⬮ 微生物检测的工作计划 ⬮
病原微生物感染引起发病，院内感染不断增加。由于人类不断婪用抗菌药物，耐药性不断增加，这些都严重危害人类健康。病原微生物在实验室潜在对实验室人员的威胁也日趋严峻。生物安全的宣教必不可少，怎样把只有基本微生物的学生，与临床实验室大量面对病人的、运送、、培养、观察、报告等各个环节的实践结合起来，由基础知识向专业技能有效转化，把基础理论知识在实习中有效发挥，与实践相结合使之升华，是培养合格检验人才的关键。现就微生物室的实习体会总结如下。
1、重视标本送检前的质量控制。
微生物实验室每天都收到来自病房，门诊病人送检的大量标本，有痰、中段尿、伤口分泌物、生殖道拭子、血培养、脓液、术中临时所采集的标本等等。标本的采集、运输和处理是否得当及时对试验结论有直接影响。是分析前质量控制的重要环节，只有让学生全面认识标本采集与处理的全过程及影响因素，才能确保检验结论的准确性、有效性。
1、1标本的采集
例如中段尿的采集，应告知学生尿道内是人体无菌的腔道，尿道外则是有菌的部位。所以采集中段尿时必须对外阴进行彻底消毒，排出前一段尿液，以便冲洗外尿道或外阴，留取中段尿于无菌杯中送检。如痰标本的采集，应嘱病人于清晨嗽洗口腔，咳出深部的痰液于无菌杯中送检，如是支原体和衣原体的检测，则应留取女性宫颈拭子或男性尿道拭子，因为支原体和衣原体都只寄生在宫颈或者尿道的柱状上皮细胞内。
1、2标本的处理
学生应知道，标本的及时处理接种对微生物的成活率至关重要，例如淋病奈瑟氏菌，需要保温，保湿送检，提倡床边接种，培养基应先预温，接种后放36℃温箱、5%co2环境，保湿培养。又如痰标本应接种在血，巧克力平板，沙基，嗜血流感巧克力平板上，血平板和巧克力平板主要观察病人痰标本里的基础菌群的生长状态。沙基主要观察是否有念珠菌生长，嗜血流感巧克力平板主要是观察是否有嗜血流感杆菌属的生长，此平板在配制时加入了针对性抗菌药物，能够抑制阴性杆菌和革兰氏阳性球菌的生长，只适合于嗜血杆菌属的生长。学生应学会每一份标本，接种到相应有用、有目的、有选择的培养基中。
2、注重特征、综合分析
细菌的鉴定是运用所学知识，综合性判断的过程。它需要根据病人基本信息，标本来源、诊断、平板上形态特征，生长情况，氧化酶、触酶阴阳性状、革兰氏染色镜下形态，生化反应，药敏结果等进行综合性判断，最终得出鉴定结果。我们在带教过程中应根据以上信息，逐项分析，深入浅出，理论联系实际，把学生在课堂中所学知识调动出来，温故知新，对病人标本的状况加以充分阐述，循序渐进，循循诱导。加深学生在视觉、听觉、嗅觉的印象。例如革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌在血平板，巧克力平板是有区别的。革兰氏阴性杆菌在平板上直径较大，约3—5mm，突起、圆形，湿润、有光泽感，我把它比作面包。革兰氏阳性球菌，在平板以上菌落直径较小，约2—3mm，较前者小、圆形、湿润。有光泽感，但不如前者，贴平板生长，我把它比作饼。一包一饼就简单易记地把革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌区分开来。使细菌菌落生活化，形象化，易于记忆。如铜绿假单胞在平板上菌落边缘不整齐，有绿色素，菌落边缘向外延长，培养时间越长菌落越大，有特殊的芳香气味。学生通过芳香气味等以上特征，进一步识认了铜绿假单胞菌。在常见的病人标本中，所检出的'细菌菌落都具固有的特征和性状，就像人与人之间通过性格，特征就能区分开来。我们也应该把各种细菌在平板上的菌落特征加以描述，学生就较易接受学懂。
3、培养学生自学能力和动手能力。
专科和本科的学生在微生物室的实习时间大约有八至九周。在第一周，会安排学习培养基的制备，在此期间学习微生物室常用培养基的制备，如巧克力平板、SS平板、麦康凯平板、药敏平板、营养琼脂平板、淋基平板、肉汤管、双糖管、TCBS平板、4号琼脂平板等的制备过程。带教老师将边带边放手让学生自己做一些基本的操作，如消毒平板、配制培养基，天平称量，复溶琼脂加血，倒平板等基本功的操作。第二周学习梅毒初筛，确证试验和血清学的一些试验，也将学习衣原体、支原体的检测方法。第三到九周将学习细菌的鉴定。用一至两周时间学习各类标本的接种，平板的选择，平板分区划线，熟练掌握接种的流程。第五周开始学习各类细菌的生化鉴定和药敏试验。带教老师应结合平板上菌落形态。镜下革兰氏染色结果，各类平板上生长情况，病人的基本资料，诊断，本标来源等基本信息分析评述给学生听，逐步推论出细菌的大致方向，正确引导学生的思路。学生在每天应对比较常见而且较有意义的细菌进行鉴定，做生化反应及药敏试验，通过四周自己动手操作，能对临床上常见的细菌有一定的认识，能把菌鉴定到种。通过实践提高学生的动手能力，熟练掌握细菌室的基本操作技能。深化理论知识，使到理论与实践融会贯通。提倡学生多提问，有疑问老师及时解答与学生的学习相动。
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微生物实验室常用仪器配置
微生物学实验室是生物学领域的一个基本实验室，对于一个完备的微生物学实验室，我们需要配置哪些仪器呢?
1、超净工作台
微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。
2、培养箱
培养箱有多种类型，它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。生化培养箱只能控制温度，可作为一般细菌的平板培养；霉菌培养箱可以控制温度和湿度，可作为霉菌的培养；CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养。
3、天平
天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平，电子天平按照精度不同有不同的级别。
4、微生物均质器
用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理，不需洗刷器皿等特点，是微生物实验中使用较为方便的仪器。
5、菌落计数器
菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大，拍照，计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。
6、微波炉/电炉
用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化。
7、高压灭菌锅
微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号，有些是手动的，有些是全自动的。根据自己的需要选购。
8、移液器
液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯等。
9、低温冰箱
冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4℃保存，有些要求是-20℃保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。
生物安全柜
微生物实验中涉及的试剂和样品微生物有些是有毒的，对于操作人员来说伤害较大。为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散，可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护。
摇床
摇床是实验室常用的'一种仪器，在微生物实验操作过程中，液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。
纯水装置
纯水装置包括蒸馏水器和纯水机。蒸馏水器的价格便宜，但在造水过程中需要有人值守;纯水机价格高些，但是使用方便，可以储存一定量的纯水。纯水使用也有不同的级别，实验中配制试剂，配制培养基均需用纯水。
生物显微镜
由于微生物体积较小，所以在观察时需要借助生物显微镜。生物显微镜用于微生物和微小物品结构，形态等的观察。
冷冻干燥机
主要适用于细菌、微生物、酵母等的干燥。用于干燥保存易脱水的产品，在加水以后能够再次恢复原材料的特性，不影响其生物活性等。通过冷冻干燥，细菌之类的材料成为干燥状态，从而不会发生化学改变。
分光光度计
分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度，可以正确选取合适的培养时间。一般是在600nm波长测定菌液浓度。
恒温干燥箱
恒温干燥箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干。烘箱有不同的控温范围，用户可以根据实验需求进行选择。例如，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干，一般玻璃用具的烘干可以选择60℃。
恒温水浴锅
水浴锅是一种控温装置，水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。有些微生物反应需要在37℃，42℃，56℃下水浴进行，所以恒温水浴锅可以提供需要的温度。
酸度计
用于配置试剂时精确测量pH值，从而保证配置的溶液的精确性。有时也需要利用pH计测定样品溶液的酸碱度。
离心机
用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。离心机有冷冻和常温之分。有些样品由于在常温下不太稳定，需要低温环境，要视样品的种类而定。
液氮罐
液氮罐储存液氮，可用于细菌、酵母、霉菌和大型真菌等各种微生物的长期保存。
以上介绍的是微生物实验室的基本仪器配置，在组建实验室时还需要其他一些耗材，例如酒精灯，试管架，三角瓶，量筒，玻璃试管，灭菌吸管，凉干架，剪刀，镊子，脱脂棉，纱布，试管筐，无菌采样及称样袋，接种环，过滤器等。实验人员可以根据自己的需求为微生物实验室配置合适的仪器和耗材。
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一、实习内容
在过去的几个月里，我有幸有机会实习在一个微生物研究实验室中。在这个实习过程中，我参与了多个项目，包括微生物培养、鉴定、抗生素敏感性测试等。同时，我也有机会观察到了微生物在不同环境条件下的生长和繁殖。
二、实习经历
在实验室中，我首先接触到了微生物培养的基本技术。我学会了如何准备培养基、制备微生物培养物，并且了解了不同微生物对不同培养条件的要求。在有经验的导师的指导下，我成功地培养出了多种微生物，并观察到了它们的生长情况。这个过程不仅提高了我对微生物生理生态的理解，同时也培养了我细心观察和实验操作的能力。
除了培养微生物，我还参与了微生物鉴定的工作。由于微生物种类繁多，鉴定是非常重要的一环。我学会了常用的鉴定方法，如染色法、生化试验等，这些方法能够帮助确定微生物的物种和特征。在实践中，我成功地鉴定出了几种微生物，并掌握了观察和分析微生物特征的技巧。
除了培养和鉴定，我还参与了微生物抗生素敏感性测试的工作。这是一个非常重要的实验，可以帮助确定微生物对不同抗生素的敏感性，从而指导临床药物使用。我学会了如何准备抗生素敏感性试验的培养基，并进行药物的稀释和培养。通过实验结果，我能够评估微生物对不同抗生素的敏感性，并帮助制定治疗方案。
三、实习收获
通过这次实习，我收获了很多宝贵的经验和知识。我深入了解了微生物的生理生态，包括其生长条件、繁殖方式等。这对于我日后从事相关工作将有很大的帮助，使我能够更好地培养和利用微生物。
我掌握了微生物鉴定的基本技能。作为一个微生物学专业的学生，这非常重要。我现在能够通过观察和实验来判断微生物的特征，这对于后续的研究工作将非常有帮助。
我也加深了对微生物抗生素敏感性的了解。在临床医学中，抗生素的使用是非常常见的，了解微生物对抗生素的敏感性可以帮助医生开出合理的处方，提高治疗效果。通过这次实习，我学到了如何进行抗生素敏感性测试，并从中获得了宝贵的经验。
四、展望与建议
通过这次实习，我认识到微生物学是一个充满挑战和发展空间的领域。我对微生物的研究领域充满了兴趣，并希望能够继续深入学习和研究。同时，我也意识到自己在实验操作方面还有很多不足之处，需要不断提高自己的技能和经验。
在实习结束之际，我想向导师和实验室的所有成员表达我的诚挚感谢。感谢他们在我实习期间给予的悉心指导和帮助，让我在这段时间里取得了很大的成长和进步。同时，我也希望实验室能够继续发展，为更多学生提供实习和研究的机会。
总 结：
通过这次微生物岗位实习，我深入了解了微生物的生理生态，掌握了微生物培养、鉴定和抗生素敏感性测试的基本技能，获得了宝贵的经验和知识。这次实习不仅提高了我的实验操作能力，同时也增强了我对微生物学的兴趣。在未来的学习和工作中，我将继续努力，不断提高自己的技能和知识水平。
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微生物遗传学复习总结
基因突变的类型
形态突变型；细胞形态改变；菌落形态改变
生化突变型：营养缺陷型；抗性突变型（抗药物、抗噬菌体）；条件致死突变型（温度敏感突变型）等。
基因突变的特点：随机性（波动实验、涂布实验、影印实验）、独立性（交叉抗性：对两种抗生素同时由敏感变为抗性，如大肠杆菌中抗四环素的突变株往往也抗金霉素。）、稳定性、可逆性、稀有性（10-9-10-
5）、诱变剂可提高突变率。
突变率: 每一个细胞在每一个世代中发生突变的机率，也是突变在每个细胞生存的单位生物学时间内发生的概率。
突变频度: 突变频度常用来表明一定数目的野生型细胞中出现的突变型的数目，因此突变频度没有涉及世代这一生物学时间单位。
化学诱变剂
①碱基类似物引起的诱变
5-溴尿嘧啶：5-BU分子结构与T非常相似，溴原子取代T第5位的甲基。
诱发突变原理：Br改变分子在酮式和烯醇式之间平衡，使5-BU更易出现烯醇式结构，形成5-BU≡G, 5-BU上溴原子的作用被邻近的基团效应所抵消，使得A=BU转变为G≡BU的倾向减弱，所以突变中GC→AT多于AT→GC。②改变DNA结构的诱变剂
亚硝酸：氧化脱氨基作用, 把氨基转变为酮基，使C→U、A →H，造成U·A和H·C碱基错配，诱发GC→AT及AT→GC的变化。
羟胺：专一地作用C，使之转变为能与A配对的形式专一性地引起GC→AT突变。
甲基磺酸乙酯EMS（烷化剂的一种）：当其烷基加到G 和T 的与氢键相结合的氧原子后，将会引起G 和T 的错配，引起AT→GC和GC→AT的转换。EMS是能使DNA的许多位点发生烷化，强烈的诱变剂。
③DNA移码突变的化合物（丫啶类化合物、溴化乙锭、烷化剂）移码突变：由于DNA分子中一对或少数几对核苷酸的增加或缺失造成的突变。
丫啶类化合物：分子多数是扁平的，能够插入到DNA的碱基对之间，是有效的移码诱变剂。这类化合物分子结构上的特点为，当与DNA接触时，能够逐渐插入到DNA链的两个碱基对之间，使原来相邻的碱基对彼此分开，当带有这类化合物的DNA复制时，很容易插入1个或2个碱基，引起移码突变。
物理诱变剂
①电离辐射：χ射线和γ射线、a射线、β射线、快中子、离子注入、宇宙射线
②非电离辐射：红外线、紫外线
辐射损伤DNA机理
直接作用假说/靶学说：细胞吸收辐射能量后，发生诸如激发、电离、弹性碰撞等多种原发性物理过程，辐射的量子击中染色体，导致发生直接的原始损伤，整个过程就好象子弹击中靶子一样。
间接作用假说：生物细胞中的分子经辐射作用先产生各种自由基，这些自由基团再进一步与细胞内含物反应并通过一系列生物化学变化造成染色体损伤。
紫外线(UV)诱变的分子机理：UV对生物的损伤主要直接作用于DNA而引起遗传物质的改变。UV可引起DNA链的断裂、DNA分子双链的交联、胞嘧啶和尿嘧啶的水合作用等多种损伤，但诱导形成胸腺嘧啶二聚体是主要的损伤。同一条链上相邻的胸腺嘧啶之间的二聚体会阻碍碱基的正常配对，影响T与A的配对，DNA复制到此位置时就会突然终止或在新链上出现错误的碱基，而引起突变。紫外线的穿透力也很弱，UV波长范围为136—390nm，其中200—300nm范围对诱变有效。254nm的UV最易被嘌呤和嘧啶碱基所吸收，因而诱变效果最强。
生物诱变剂
插入因子、转座子、转座噬菌体：可以诱导这些转座因子向目标细胞中转移，插入目的基因中，造成基因突变。
不论是自发突变，还是诱发突变，都是通过理化因子作用DNA，改变其DNA结构，并最终改变遗传性状。
自发突变：受自然条件下存在的未知理化因子作用产生的突变； 诱发突变：人为地选择了某些可强烈影响DNA结构的诱变剂处理所产生的突变。诱变所产生的突变频率和变异幅度都显著高于自发突变。
引起自发突变的原因：生物体内存在的各种转座遗传因子的跳动；背景辐射和环境诱变；微生物自身所产生的诱变物质的作用；互变异构；环出效应。突变热点：指DNA链中具有很高突变率的碱基位点。突变热点具有远高于一般位点的突变率。原因：5-甲基胞嘧啶（MeC）的存在；与DNA序列结构有关。
转座遗传因子：存在于细胞内，位于染色体或质粒上的一段特殊、可移动的DNA序列。
转座：转座遗传因子改变位置的行为。
转座子的转座遗传效应
①具有插入突变效应，扩散抗药性基因；
②使受体菌基因组发生缺失、重复、易位或倒位等重排，在某些情况下还可以启动或关闭某些其它基因；
③极性效应：转座因子插入到一个操纵子的上游基因时，不仅破坏被插入的基因，而且也大大降低位于远离启动子一端的其他基因的表达。
应用：获得各种突变株、判定未知基因的位置、构建不同质粒融合或复制子融合的特殊菌株。
转座因子的类型和结构：插人序列（又称IS因子）；转座子（又称易位子，Tn）（非组合型转座子-Ⅱ型转座子；转座噬菌体--Ⅲ型转座子，如Mu噬菌体；整合子；逆转座子－第2类内含子；接合型转座子；可移动转座子。转座机制：保守转座；复制转座； 剪切转座；逆转座。转座诱变：随机诱变、定位诱变。
真正的回复突变：突变基因上被改变的碱基对在第二次突变时恢复成原来的碱基顺序，真正恢复到野生型基因的功能。抑制基因突变：在DNA的不同位置上发生第二次突变抑制了原来突变基因的表达，恢复野生型表型，而不是直接改变回原来的野生基因型。抑制作用：使突变型恢复为野生型表型，但这种恢复并非由于回复突变所造成，而是由于基因内抑制或基因间抑制所造成的一种表型上的恢复。
基因间抑制：指某一突变基因恢复野生型表型是由于另一座位的突变造成的，后一基因就称为前一基因的抑制基因。这种抑制作用发生在两个基因之间，所以称为基因间抑制作用。基因内抑制：指某一突变基因表型的恢复是由于这一突变基因内的另一位点上的突变所造成。
基因内抑制：置换抑制；移码突变的抑制。
基因间抑制：错义突变的抑制；无义突变的抑制；移码突变的抑制；基因间抑制—代谢抵偿。
DNA损伤的修复和基因突变有密切的关系，微生物细胞内存在着一系列的修复系统，DNA分子某一结构的改变或损伤(即前突变)，并不一定会导致产生真正的突变，DNA损伤修复是细胞中多种酶共同作用的结果。
DNA损伤的修复：错配修复；光复活作用（紫外线照射后在DNA上形成的(T=T)，可见光(波长300-600nm)照射，细胞内光复活酶识别T=T，利用光量子的能量将T=T的环丁酰环打开。光复活作用是一种高度专一的修复方式，它只作用于紫外线引起的DNA嘧啶二聚体，不含光复活酶的生物细胞，没有光复活能力）；切补修复（碱基切除修复，核苷酸切除修复）；重组修复；SOS修复（增加细胞内原有修复酶的合成量，诱导产生新的修复酶系统）；适应性修复。
两类修复机制（避免差错(无误)修复：错配修复、光复活作用、适应性修复和切除修复；倾向差错修复系统：切补修复、重组修复、SOS修复。DNA损伤修复的生物学意义：维持生物的遗传稳定性和延续，保证复制的准确性和生物的稳定性；提供突变的基础（分离延迟：由于DNA损伤经过修复，可能产生杂合双链，必须经过复制才能产生突变的子代双链，而且还要经过一次复制，细胞中才出现突变基因型。生理延迟：在一个野生型的细胞中，虽然产生了突变，出现突变基因型，但其表型可能仍然是野生型，必须经过数次分裂才能将原有的野生型酶的浓度稀释，逐渐表型突变的表型。）；修复与进化的关系；DNA修复与遗传疾病及肿瘤的关系。
诱变育种：采用理化、生物等诱变因素处理微生物，使其DNA发生改变，提高突变率，扩大遗传变异幅度，筛选出所需菌种的过程。
诱变育种程序：菌悬液的制备、诱变处理、突变后筛选、鉴定。
菌悬液的制备
细胞：分散状态的单倍体或单核细胞。菌龄：应采用对数期细胞。
用UV诱变时应采用的剂量：致死率70％左右为宜。
诱变剂选择原则：(1)诱变作用强；(2)诱变效果好；(3)使用安全；(4）操作方便。
营养缺陷突变株：由于丧失了合成某种营养物质(如氨基酸、核苷和维生素等)的能力后，在基本培养基上不能生长，只有在基本培养基中加入该突变菌株所缺陷的营养物质后才能生长。
筛选程序:诱变、浓缩、检出、鉴定。
浓缩的方法：菌丝过滤法；饥饿法；青霉素法：差别杀菌法（加热法）。常用的检出方法：夹层法；限量补充法：影印法：点种法。营养缺陷型的鉴定方法主要有两种：生长谱法；分类生长法。
利用鉴别培养法筛选突变型
碘液：指示供试菌液化淀粉酶活力的大小。
抗毒素：先用霍乱弧菌毒素制备成抗毒素（抗体)。产生毒素的菌落：周围混浊圈（毒素和抗毒素沉淀反应)。不产毒素的菌落：周围无混浊圈。
高产菌株的筛选
初筛：一般不作重复并应尽量利用表型特征，将有高产潜力的突变株筛选出来，然后再进入摇瓶筛选
复筛：初筛选出较好的少数菌株进行复筛，随着测定菌株数目的减少，重复数可逐步增加，以提高其可靠性。
转化作用过程（Transformation）（肺炎双球菌）
感受态(competence)：细菌能够从周围环境中摄取DNA分子，并且不易被细胞内的限制性核酸内切酶分解时所处的一种特殊生理状态。肺炎链球菌、枯草杆菌---对数后期。
前整合复合物
在G+细菌中，单链DNA与SSB蛋白质结合，形成前整合复合物。至少3种作用： ①保护供体DNA免受降解； ②促进DNA的吸收；
③增强单链DNA的刚性，促进单链DNA的整合在肺炎双球菌中，这种结合蛋白位于细胞质，而在枯草杆菌中，这种蛋白位于周质空间。G-细菌: 2种机制使DNA双链保持稳定：
①DNA在周质空间与一种蛋白非共价结合形成复合物；
②DNA与一种泡状细胞表面结构结合形成复合物。这2种复合物都是DNase抗性的。
转化因子的整合
①前整合复合物定位在染色体附近；
②单链侵入，形成一种不稳定的受-供体复合物；
③单链全部侵入，形成一种稳定的受-供体复合物，被取代的受体单链被降解；④形成一种共价闭合的复合物——异源双链
DNA；
⑤经错配修复，成为含外源DNA的转化子，或正常的受体DNA。细菌吸附DNA双链，但吸收的是DNA单链
人工转化系统
人工方法处理可诱导感受态的产生，提高转化效率：利用Ca2+和改变温度的方法；
F因子可以通过重组插入细菌染色体中形成Hfr的细胞。
Hfr中F因子：可从染色体正常脱离下来恢复成F+，也可错误脱离形成F´细胞。Hfr×F-的接合作用：由于接合作用使部分染色体基因转移的频率比F+×F-高1000倍以上，因此又称为高频重组作用(high frequency recombination)。因为F因子在Hfr细胞中已和染色体结合成一个复制子，所以F因子在接合转移时PEG介导的转化：电转化（电穿孔法）。
共转化：在某些情况下受体细菌也能同时得到供体的两种性状。这种受体细菌吸收外源DNA后同时出现两个遗传性状改变的现象称为共转化。
接合作用（大肠杆菌）(Conjugation)选择性标记：观察对象所带有的（遗传）标记，依据这种标记可以获得生长优势，或者失去生长优势；观察者依据这种标记可从混有不同基因型的群体中获得具有该标记的个体，选择重组子。
非选择性标记：观察者在一次试验中没有使用的、观察对象具有的（遗传）标记，观察分离现象。正向筛选：依据选择性标记可以通过一次试验将带有选择性标记的个体筛选出来，如抗性标记。
反向筛选：必须通过几次试验才可以将带有该标记的个体筛选出来，如营养缺陷性标记。
正反杂交实验证明：细菌重组的发生只是染色体单方向的转移，染色体的转移往往不完全。实现接合作用需要性状各异的2种菌株，当时称为雄性(供体)和雌性(受体)两种类型。受体菌或雌性菌的生活力及遗传特性对于成功的接合作用是致关重要的。
F因子基因组3个区段：控制自主复制，含有复制酶基因(rep)、决定不相容性的基因(inc)、复制起点(oviV)；转移区段；插入区段（4个），有利于F因子在不同位点插入受体菌染色体形成不同的高频重组菌株(Hfr)。能带动染色体DNA进入受体，杂交子绝大多数仍是F-细菌。F´×F-的接合作用：F质粒在脱离Hfr细胞的染色体时会发生差错，形成带有细菌某些染色体基因的F´因子（类似温和噬菌体λ）（包括带有不完整F因子的Ⅰ型和带有完整F因子的Ⅱ型）。此接合作用能专一性地向F-转移F´质粒携带的供体菌基因，称为F因子转导或性因子转导。
中断杂交试验：在接合的特定时间内人为地中断杂交以测定重组子的方法。在Hfr×F-杂交中Hfr细胞的染色体从整合的F因子的oriT位点开始逐渐向F-细胞转移。转移过程可以随时被中断，靠近转移起始点的基因会有更多的机会出现在F-细胞中，愈是后端的基因机率愈小。根据接合后F-细胞中来自Hfr细胞的基因出现的频率就可判定基因转移的先后及其在染色体上的位置。
转导作用（Transduction）（伤寒沙门氏菌）转导噬菌体的类型 ①普遍性转导噬菌体
普遍性转导噬菌体：温和噬菌体或者某些烈性噬菌体感染供体菌后，在裂解过程中因错误包装而产生的。外壳蛋白中包裹的主要是供体菌的DNA，所形成的是非溶源性转导子。既能溶源又能裂解的鼠伤寒沙门氏菌的P22和大肠杆菌的Pl。
②局限性转导噬菌体
局限性转导噬菌体：温和噬菌体感染供体菌后，先经溶源反应整合，最后再经诱导而产生的。如大肠杆菌的温和噬菌体λ和φ80。λ噬菌体DNA为双链分子，普遍性转导(general transduction)：供体的单个或紧密连锁的少数基因被噬菌体因错误包装而转移给相应受体的作用称为普遍性转导。寄主的任何一个基因都有可能被它们转导。但也有少数情况下两个基因同时被转导，这种现象称为共转导或并发转导
普遍性转导的两种结果：
(1)完全转导(稳定的转导子)：由噬菌体导入的DNA片段通过双交换整合到受体染色体上与寄主染色体同步复制。每个子细胞都保持了这一导入的DNA片段。由完全转导形成的每一子细胞都已恢复正常，形成正常大菌落(2)流产转导(不稳定的转导子)：完全转导需要RecA和RecBC蛋白的参加。若RecA有缺陷，供体DNA片段不能整合到受体染色体上，本身又没有独立复制的能力，因而在细胞分裂过程中，结果只有一个细胞能获得导入的片段而成为单线传递的方式，这种转导称为流产转导。在流产转导中，只有个别获得供体片段的细胞是正常的，而多数细胞仍保持受体的缺陷型性状并只能依靠细胞内残存的酶分裂，流产转导形成小菌落。
局限性转导(specialized transduction)：只能使供体的一个或少数几个基因以噬菌体为媒介转移到受体的转导作用称为局限转导。大肠杆菌的温和噬菌体λ只能转导大肠杆菌的gal或bio基因。
坎贝尔模型(Campbell)（1962）：λ→寄主细菌→环化→附着位点att→染色体同源部分发生配对→交换→→直线地整合到寄主染色体上，与寄主同步复制→原噬菌体，插在gal和bio基因之间。经UV等诱导后它又可以脱离寄主染色体，并可以极低的频率发生偏差的错误脱离。
低频转导:用含有λdg的裂解液感染非溶源性的Gal-细菌时，有些细胞接受λdgDNA，获得供体的gal+基因，λ原噬菌体发生错误脱离的机率约为10-6，诱导λ溶源性菌株得到λdg的频率也是l0-6，故称为低频转导。
低频转导通常有两种结果： ①稳定的转导；λdg携带的gal +基因与受体上发生突变的gal-基因发生双交换而取代了突变基因，gal +稳定随染色体复制，频率占1／3。②不稳定的转导，占2/3。
高频转导(high frequency transduction，HFT)：λdg丢失本身部分基因，没有插入、整合能力。
若λdg和λ同时感染，前者的缺陷便由后者补偿，λ首先在att以正常的方式整合，产生“杂合”附着位点，λdg在杂合位点整合，形成λ/λdg 的双重溶源菌。
放线菌的致育因子 三种不同的类型
1.原始致育型IF(相当于大肠杆菌的F+)，2.正常致育型NF(相当于大肠杆菌的Hfr)3.超致育型UF(相当于大肠杆菌的F-)。三种致育型菌株之间的关系：
(1)IF×UF可以杂交，而且杂交的后代全部转变为IF，但基因重组的频率都相当的低，类似于大肠杆菌的F+×F-杂交。
(2)NF×UF也可以杂交，而且染色体基因的重组频率高。它类似于大肠杆菌中的Hfr×F-杂交，属于高频率重组。
(3)从IF菌株中可以得到UF菌株，也可以得到NF菌株，而且经过消除剂的处理后得到UF的频率可以提高。
原核微生物的基因重组
基因重组: 2种不同亲本的DNA分子在同一生物体内经过交换作用而产生新的重组DNA分子，两个不同生物个体交换遗传物质并进行重新组合，以产生具有新基因型和表型个体的过程。
噬菌斑(plaque)：噬菌体感染敏感宿主细菌以后在含受体菌的涂布平板上形成的肉眼可见的透明圈。
涂布效率：单个噬菌体颗粒侵染敏感细菌后产生的噬菌斑数量称为e.o.p。
感染复数(m)：为单个宿主细菌细胞感染的噬菌体颗粒数。
裂解量(burst size)：感染烈性噬菌体之后的单个宿主细胞所释放的子代噬菌体的平均数量。
温和噬菌体侵染相应的寄主细菌后能将其DNA整合在细菌染色体上而进入溶源化循环；整合在染色体上的原噬菌体受UV等因素的作用又可脱落下来进入溶菌循环。
顺序排列四分体的遗传分析
粗糙脉胞菌(Neurosporacrassa)在有性生殖过程中，每个合子核减数分裂的全部产物不仅同处于一个子囊内，并且呈直线排列。这样以直线方式排列在同一个子囊内的四个减数分裂产物称为顺序排列四分体。
还原分裂: 在减数分裂的第一次分裂中，来自同一亲本的两个A和另一亲本的两个a发生相互分离分裂，导致2个基因型在第1次分裂分离。在减数分裂过程中接合型基因座位(A或a)与着丝粒之间未发生染色体交换。
均等分裂:在减数分裂的第一次分裂中，来自双亲的各一个A和a趋向一极，另两个A和a趋向另一极。两个基因型不发生分离，直到第二次核分裂时，两个基因型才发生分离。导致两个基因型在第2次分裂分离。在减数分裂过程中接合型基因座位(A或a)与着丝粒之间发生了染色体交换。
经典遗传学：如果染色体上两位点之间的距离越远，则两位点之间发生交换的频率越高。因此如果某一基因离丝粒的距离越远，则发生交换的频率越高，出现第二次裂分离的子囊数也就越多。
着丝粒距离：某个基因和着丝粒之间的距离。着丝粒距离＝
[0.5*（第二次分裂分离子囊数）/ 子囊总数]*100
重组频率：两个基因的着丝粒距离之和(2个基因位于着丝粒两侧)或着丝粒距离之差(2个基因位于着丝粒同侧)。重组频率=(重组染色体单体数/染色体单体总数)*100%
=[(2T+4NPD)/4(T+PD+NPD)]*100% =[(0.5T+NPD)/(T+PD+NPD)]*100%
双亲型(PD)：不含重组染色单体；非双亲型(NPD)：4条重组染色单体,；四型(T): 2条重组染色单体
真菌的准性生殖
准性生殖循环(parasexualcycle)：不通过减数分裂、导致基因重组。真菌的许多类群，特别是半知菌亚门中，虽然没有或很少发生有性生殖过程，却仍然表现出了较高频率的变异。
准性生殖过程中相互关联的几个阶段：异核体的形成（互养的排除及单倍重组体和二倍体的排除）、体细胞二倍体、细胞有丝分裂过程中的染色体交换、染色体不分离产生的非整倍体和重组单倍体。
互养：两个不同的营养缺陷型细胞通过培养基交换营养物质的现象。
异核体：不同遗传性状的2个单倍体细胞或菌丝相互融合，1个细胞、菌丝中并存有2种以上不同遗传型的核，由菌丝融合形成异核体的现象叫异核现象
异核现象的意义：在自然界里普遍存在；有利于出现生长优势；异核体内含有不同基因型的核，丰富种群基因库，增加种群的适应性与可塑性；异核体内不同基因型核数目的比例可以随环境条件而改变，因而有利于适应环境的短期或长期波动；异核体的变异力较强，变异潜能较高，在多变的环境条件下，异核体比杂合体有更强的可塑性和适应性。
核融合(nuclear fusion)：指两个单倍体核融合形成一个二倍体核的现象。基因型相同的核融合形成纯合二倍体，基因型不同的核融合形成杂合二倍体。
质粒的不亲和群:不同质粒在同一宿主细胞内的共存性，属于同一不亲和群的质粒不能在同一细胞内共存。能在同一细胞内共存的质粒应属于不同的不亲和群。质粒的这一特性又称为不相容性特性和来源相近的质粒通常属于同一个不亲和群，不能在同一宿主细胞内共存。
高拷贝数质粒：质粒在子代细胞中的丢失常需要多次分裂才能实现。
质粒遗传的稳定性：正常条件，质粒应在细胞分裂前复制，借特殊分配机制以保证其在子代细胞中的均等分配。
F质粒实现稳定性的特殊机制：复制没有完成时，F质粒能阻遏细胞分裂，但却不抑制细胞的生长和染色体DNA复制。只有待F质粒复制完成后，细胞才能进行分裂。ColEl 等高拷贝质粒: 没有par基因，可依赖高拷贝质粒的随机分配，实现稳定性cer基因负责多聚体解聚为单体质粒，保证质粒在细胞分裂时的稳定性。致死蛋白保证质粒稳定性。
在真核微生物中，核外遗传物质主要：线粒体、叶绿体DNA、酵母菌2μm质粒。酵母菌的2μm质粒：为5.9kb，长1.95μm，拷贝数为50-100，该质粒含有约600bp的反向重复序列，由于它们之间的互换作用而使它有A和B两种互变异构型，其中A型质粒可被EcoR酶切成2.3和3.6kb两个片段，B型则切成2.1和3.8kb两个片段。由于反向重复序列的存在，使2μm质粒经变性后再复性时也可以形成类似于转座子的典型的茎环结构。
质粒的消除：高温、丫啶橙、丝裂霉素C、溴化乙锭和利福平等常用于质粒消除。
经典遗传学家认为: 基因是遗传物质DNA(或RNA)上的一个特定区段，既是一个可以表达产生蛋白质(酶或多肽)的功能单位，同时又是一个交换单位和突变单位，基因是不可分割的、三位一体的最小单位。
操纵子学说：Jacob和Monod 研究大肠杆菌乳糖发酵, 1961提出调控乳糖发酵基因的操纵子(operon)学说。
操纵子: 调节基因、操纵基因、启动子、结构基因。包括可转录表达的调节基因和结构基因；也有只起作用但不转录也不翻译的操纵基因和启动子。操纵子是由多个基因组成的调节、信息传递和功能表达的统一体。
现代认识的基因：重叠基因、重复基因、间隔基因、跳跃基因、活化子和增强子。
现代的基因概念可以归纳如下：
1.基因不再是抽象的符号，是携带遗传信息的DNA或RNA片段。
2.基因不再是突变、重组和交换的基本单位，而只是具有特定功能的遗传单位,。
3.基因是遗传信息传递和代谢、分化、发育的依据。
基因功能上可分为： 可转录和表达的：
结构基因：编码蛋白质（结构蛋白、酶、）调节基因：（阻遏蛋白、激活蛋白）只转录不表达的：tRNA、rRNA
不转录不表达的：操纵基因、启动子、活化子、增强子
“一个基因一种酶”假说的初步验证
一个基因功能→控制一种酶的一级结构，通过该酶控制的代谢反应来实现其生理功能。基因突变使酶的一级结构改变，使酶失活，中断它所催化的代谢反应。酶活性的丧失其他原因：可能来自于某些抑制物的产生，因产酶机能的改变而没有合成出这种酶。这一假说验证的关键是证明在突变株中有失活酶的存在。
交叉反应物质(CRM)：失去了酶活性但仍保持血清学反应特性的物质。
互补作用的测验系统：互补作用是使二个突变型的染色体同处于一个细胞内，在不发生基因重组的条件下，由于相应突变型细胞内正常基因的相互补偿而使表型正常化的作用。
互补作用实质：是两个突变菌株正常基因在同一细胞内的互养作用，避开基因产物向胞外分泌和扩散等问题，使测定结果更为准确。
互补测验条件：recA突变菌株，避免2个突变型染色体之间的重组作用。符合要求的测验系统：二倍体、局部合子、异核体、感染了两个突变型噬菌体的寄主细菌。常用的互补作用测验系统有：
①异核体形成测验：不能形成异核体可能原因：除了由于等位基因突变而不能互补外，还可能由于2个突变株之间的不亲和性，即2个菌丝体之间不能经质配形成异核体。不能形成异核体，也不能说明2个突变位点属于等位基因，一次互补测验难于准确判断突变基因等位性。② 异核体形成测验和互养测验差异： 互养测验：2个突变株之间相互提供的是分泌到细胞外的自身不能合成的代谢产物； 异核体形成测验：在同一细胞内2个突变株染色体提供的是基因的产物或酶顺反位置效应测验
顺反位置效应测验：比较结构基因的顺式和反式结构表型效应的互补测验。rⅡ只能在B上形成r型噬菌斑，在S上形成野生型的正常噬菌斑；在K上不能复制、不能形成噬菌斑；彭泽用两个rⅡ突变型混合感染B菌株，采用单菌释放技术，将从B菌株释放的噬菌体去感染K菌株平板；如果能形成噬菌斑，则表明供试的两个rⅡ突变型不相同，能在寄主B菌株细胞内通过染色体交换、重组产生野生型子代噬菌体；只有rⅡA+ rⅡB+ 才能感染K菌株、形成噬菌斑，而重组型rⅡA-rⅡB-不能感染K菌株。r51或rl06单独感染K菌株：都不能复制，不会产生噬菌斑。但混合感染却可以裂解K菌株并得到r51、r106和野生型等3种噬菌体。r47-r106的距离虽然比r51-rl06的距离大，但用它们混合感染K菌株后却不能在指示菌株B上获得噬菌斑。
结论：两个rⅡ突变型混合感染时出现噬菌斑，首先是由于互补作用，恢复了复制能力，然后在复制过程中发生重组，产生野生型噬菌体用r51和r106混合感染，可把寄主K细胞看成两个rⅡ突变型染色体的杂合体：(r51-rl06+)／(r51+r106-)。在这一杂合体中的r51+和r106+由于功能上的互补关系，使突变株均得以进行复制。对所有rⅡ突变型进行两两互补测验，可以将rⅡ的突变位
点分为A和B两大群，属于同一群内的任何两个突变型都不能互补；属于群间的两个突变型无论位置远近均能互补。
顺反位置效应测验结果证明：基因是有功能的一段连续DNA，只有通过顺反测验才能确定一个顺反子或一个基因的界限。一个基因的任何位点均可以发生突变，属于同一基因的不同突变也可以发生重组，因此基因只是一个功能单位而不是一个突变或重组的单位。
顺反位置效应：所要考察的两个突变位点在顺式结构和反式结构遗传效应不同的现象。具有顺反位置效应的两个位点属于同一个基因（顺反子）。
杂基因子：含有个别处于杂合状态基因的细胞。利用大肠杆菌λ噬菌体在高频转导过程中形成的λdg或λdb转导子去感染相应的缺陷型宿主细胞就容易获得杂基因子。
基因间互补作用：在进行顺反位置效应测验时，如果供试基因或顺反子的结构完整，那么属于同一基因或顺反子的两个突变株将能互补，如果两个突变株能够互补，那么突变应涉及不同的基因或顺反子。基因内互补作用：某些已通过生物化学等其他实验肯定是属于同一基因的两个突变株之间有时也能表现出一定程度的互补作用。基因突变使其产物酶蛋白的结构发生改变而失活，只是由于两个突变株之间的基因内互补作用，才使活性部分得以恢复；两个突变株的突变位点间距离愈近，其离体互补作用 愈弱，距离愈远，其互补作用愈强。
互补群：属于同一基因突变的相互间能表现出一定程度互补作用的一群突变株。属于同一互补群的基因突变均表现为同一种酶蛋白的功能缺陷。
i+:编码阻遏蛋白，与O结合，阻止RNA聚合酶通过O位，阻止操纵子的表达；阻遏蛋白与乳糖结合失去活性，不能与O结合，RNA聚合酶通过O位，操纵子表达；
i-:阻遏蛋白不能与O位结合，RNA聚合酶通过O位，操纵子表达；
is:阻遏蛋白突变，不能与乳糖结合，与O紧密结合，RNA聚合酶不能通过O位，操纵子不能表达； Oc：操纵基因突变，不能与i+ 编码阻遏蛋白和is 编码的突变阻遏蛋白结合，RNA聚合酶通过O位，操纵子组成型表达。
负控制系统(negative): 某一细胞成分的存在使得某种细胞功能不能实现, 这种成分的消失或失活, 这一功能才能得以实现.正控制系统(posotive): 某一细胞成分的存在使得某种细胞功能能够实现, 这种成分的消失或失活, 这一功能不能实现.乳糖操纵子:负控制诱导系统典型代表，环境中没有乳糖、半乳糖苷或IPTG等诱导物，调节基因产生的阻遏蛋白与操纵基因结合，阻止了lac操纵子结构基因的表达。诱导物出现时，由于它的结合使阻遏蛋白失活，结构基因才得以表达。在负控制系统中，阻遏蛋白是主要的调控因子。葡萄糖对lac操纵子表达的抑制是间接的，不是葡萄糖本身而是其降解产物抑制cAMP的合成。cAMP—CAP复合物与启动子区的结合是lac mRNA转录起始所必需的，因为该复合物结合于启动子上游，能使DNA双螺旋发生弯曲，有利于形成稳定开放型启动子-RNA聚合酶结构。如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中，lac操纵子处于阻遏状态，不能被诱导；一旦耗尽外源葡萄糖，乳糖就会诱导lac操纵子表
达分解乳糖所需的三种酶。当阻遏蛋白封闭转录时，cAMP—CAP对该系统不能发挥作用。如无cAMP—CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。
色氨酸合成途径中的末端产物阻遏现象：当合成足够的色氨酸时,阻遏蛋白+色氨酸（辅阻遏物）→复合物→激活,当色氨酸不足时:阻遏蛋白（无色氨酸辅阻遏物）→无活性,阻遏蛋白：变构蛋白。
操纵子的结构和功能：完整的操纵子主要应包括启动子、操纵基因、调节基因、结构基因和终止子等5个部分。P：启动子, O：操纵基因T：终止子，UAS：上游活化序列：a：弱化子, ENH：增强子, A，B：结构基因
代谢调节机制
转录水平：正调控和负调控, 诱导和阻遏，上游活化序列、弱化子、终止子 翻译水平：SD序列, 稀有密码子, 重叠基因, po1y(A), 魔斑核苷酸，反向RNA
反馈抑制：由代谢终产物抑制酶活性的反馈作用。
反馈抑制的种类：同功酶反馈抑制、协同反馈抑制、合作反馈抑制、积累反馈抑制、顺序反馈抑制。
反馈抑制特点：①只有终产物或相似的类似物才具有反馈抑制作用;②受到抑制作用的一般是代谢途径中的第一个酶;③反馈抑制作用一般是可逆的。代谢途径中的其他酶无须抑制就失去活性,所以反馈抑制是一种简单有效的调节作在反馈抑制中，终产物抑制第一个酶的活性,终产物的分子结构显然不同于酶的底物.竞争性抑制作用：抑制物和酶的活性中心相结合。
反馈抑制：抑制物和酶的另一部位--调节中心--结合,导致酶的空间构象发生变化,降低乃至丧失催化活性。
具有2个不同结合部位而又相互作用的蛋白质叫变构蛋白;引起结构变化的小分子叫变构效应物,具有反馈抑制效应的酶叫变构酶.代谢拮抗物(类似物)：和代谢终产物结构相似,同样能和阻遏蛋白或变构酶结合,但拮抗物不能被细胞利用,所以浓度不会降低,实际上形成不可逆结合,导致细胞死亡。所以代谢拮抗物(类似物)对细胞是有毒的。变构酶+ S(终产物)→反馈抑制
阻遏蛋白+ S(终产物)→停止转录(可逆)变构酶+ S’(类似物)→抑制→死亡
阻遏蛋白+ S’(类似物)→停止转录→死亡
变构酶结构基因突变：使变构酶的抑制部位(调节中心)既不能和代谢拮抗物相结合，也不能与正常的终产物结合，但其活性中心不变，因而仍具有酶促作用。这种突变型是抗代谢拮抗物和抗反馈的双重突变型，能够在细胞已经积累有大量终产物的情况下，仍然不断合成这一产物，用抗反馈突变型提高产量的原理。变构酶+ S’(类似物)→不结合→生长
变构酶+ S(终产物)→不结合→解除反馈抑制→积累产物 阻遏蛋白+ S’(类似物)→不结合→生长
阻遏蛋白+ S(终产物)→不结合→→解除阻遏→积累产物
青霉素法：青霉素能抑制细菌细胞壁的合成,杀死正在生长的细胞，但对于停滞生长的细胞则不起作用。把经诱变处理的细菌接种在只能使野生型生长，而不能使缺陷型生长的基本培养基(同时加入一定浓度的青霉素)中培养，未突变的野生型将因生长而被杀死，而缺陷型由于不生长而得以浓缩。
生长谱法：本法是在同一培养皿上测定一个缺陷型对于多种化合物的需要情况。
分类生长法：本法是在同一培养皿上测定多个缺陷型对同一生长因子的需要情况利用饥饿法筛选温度敏感突变型。
营养缺陷型筛选原理：单一缺陷型微生物因代谢不平衡而易于死亡，结果使得双重突变的微生物反而得以浓缩。
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有关微生物手抄报
随着我们生物的学习，同学们可以发现，生物的知识点比较多，比较难记，要想更好地学习生物，我们需要掌握一定的学习方法。掌握好的学习方法有助于我们在生物学习上更加的高效。下面为的家介绍一些好的生物知识记忆法，希望对于大家的学习有所帮助。
一、五官并用记忆法
心理学认为，记忆实质上是感知过的事物在人脑中留下的痕迹，所以靠多种感官感知则比单靠某一感官感知留下的痕迹要多、要深。在日常的学习中，大多数同学只知道用单一感官感知，要么只用眼看，要么只读，要么只是手写，而很少多种官并用，故记忆的效果就差。为此，我们要求学生在记忆过程中，尽可能调动多种感官，协调记忆，做到眼看、耳听、口读、手写、脑记，其中最重要的是脑记，切莫心不在焉。
二、化整为零记忆法
化整为零记忆法的`根据就是整体由相互联系，不可分割的要素、环节构成的。一本书、一课、一节都可看作是一个整体，都是由若干个不可分割的部分构成的，要把握所要掌握的知识，就需要化整为零，循序渐进地记忆。化整为零记忆法使复杂、繁锁的问题简单化，强化了记忆的效果。
三、分层记忆法
许多生物知识是层层深入的，这就要求学生在记忆的过程中采用分层记忆法，就能深刻理解、把握知识。
四、比较记忆法
就是对所记忆的知识进行比较，找出其相同点和不同点、区别与联系的过程。
五、结构体系记忆法
此种记忆方法多用于复习。学完一节、一课、一本书总要进行复习巩固，这就需要学生必须了解所复习内容的结构体系。首先找出贯穿于知识的主干部分，再根据知识间内在的逻辑关系把分支内容串联在主干之上，抓住主干顺序记忆分支内容，再把每一分支中更细小的内容填充进去，个个知识点犹如“冰糖葫芦竹签串”，可以有效地避免遗漏或张冠李戴的毛病。
在生物的学习过程中，对于书上的知识点我们都很有必要去记忆，因为这些都是我们生物学习的基础。希望以上所介绍的生物知识记忆法能够为大家在背诵知识点的过程中带来一些帮助。希望同学们在平时的学习中经常性的运用这些方法，学好生物。
⬮ 微生物检测的工作计划 ⬮
微生物检验员是医学、农业、食品等领域中非常重要的职业，他们利用先进的仪器设备和专业知识，检验和分析样品中的微生物，以确保公众的健康和安全。微生物检验员工作计划是他们每天开展工作的指导，它详细规划了他们的任务安排、质量控制、实验方法和报告撰写等方面，以实现准确和可靠的检验结果。
微生物检验员的工作计划包括任务安排。他们负责接收样品，并按照优先级安排检验顺序。不同样品的处理和检验时间可能各不相同，他们需要根据工作量和时间限制来安排任务。比如，食品中毒事件发生时，微生物检验员需要优先处理相关样品，并尽快提供结果以帮助公共卫生部门做出应对措施。他们还需要与同事共同协作，确保工作的高效和顺利进行。
质量控制是微生物检验员工作计划中一个关键的方面。微生物检验是一个精细且复杂的过程，需要严格遵循标准操作程序和质量控制要求。检验员需要按照预定的方法，准确地进行样品的预处理、培养和鉴定等步骤。在整个过程中，他们还需要进行正、负对照实验，以确保结果的准确性和可靠性。检验员需要每天定期校准仪器设备，并参与质量控制项目，以持续提高检验水平和精确度。
实验方法也是微生物检验员工作计划的重要组成部分。针对不同的样品类型和检验要求，微生物检验员需要掌握多种实验方法。例如，对于食品样品，他们需要进行菌落计数、病原菌检测和抗生素残留测试等。对于环境样品，他们可能需要进行水质和空气质量监测。检验员需要定期学习和更新相关的检验技术和方法，以适应不断变化的需求和新兴的微生物检验技术。
微生物检验员工作计划中的最后一个重要环节是报告撰写。检验员需要将他们的检验结果准确地记录并编写成报告。这些报告通常包括样品的基本信息、检验方法和结果等内容。报告的准确性和清晰度对于其他专业人员和决策者非常重要，因为他们需要依据这些报告采取相应的措施或制定政策。检验员需要具备良好的书面表达和沟通能力，并保证报告的及时提交。
微生物检验员工作计划是他们执行工作任务的关键指南。一个详细、具体且生动的工作计划能够帮助微生物检验员高效、准确地开展工作，确保检验结果的质量和可靠性。虽然每天面临的样品不同，工作计划的合理性和灵活性能够让他们在快节奏和变化多样的工作环境中胜任。微生物检验员的工作计划不仅影响他们个人的工作效率和发展，也直接关系到公众的健康和安全。建立科学有效的工作计划是微生物检验员必不可少的职业素养之一。
⬮ 微生物检测的工作计划 ⬮
通过此次实习，我学到了很多课堂上学不到的东西：亲自动手配培养基，分离、纯化菌类，学会使用分光光度计制作生长曲线，同时参观了一些与微生物紧密相连的公司，了解其运行模式、实践技术和应用。这让我清楚地感到了自己肩上的重任，看清了自己的人生方向，也让我认识到了科研工作应支持仔细认真的工作态度，要有一种平和的心态和不耻下问的精神，不管遇到什么事都要去思考，多听别人的建议，不要太过急燥，要对自己所做的事去负责，不要轻易地去承诺，承诺了就要努力去兑现。实习也培养了我的实际动手能力，增加了实际的操作经验，对实际的科研工作的有了一个新的开始，更好地为我们今后的工作积累经验。
我知道科研工作是一项需要热情的事业，并且要持之以恒的精神和吃苦耐劳的品质。我觉得重要的是在这段实习期间里，我第一次真正地接触了实验，在实践中了解了一些科研技术，并且在此期间，我参观了一些公司，也与社会有所接触。利用这次难得的机会，也打开了视野，增长了见识，为我们以后进一步走向社会打下坚实的基础。
实习期间，我从末出现无故缺勤。我认真听取老师的指导，对于别人提出的实验建议虚心听取，并能够仔细观察、切身体验、独立思考、综合分析，并努力把学到的知道应用到实际实验操作中去，尽力做到理论和实际相结合的最佳状态，培养了我的耐心和素质。
为期两个多星期的实习结束了，我在两个多星期的实习中学到了很多在课堂上根本就学不到的知识，受益匪浅。回想自己在这期间的实习情况，也有不足之处。对此我思考过，学习经验自然是一个因素，然而更重要的是心态的转变没有做到位，有些实验步骤还是停留在应付的层面上。现在发现了这个不足之处，应该还算是及时吧，因为我明白了何谓工作何谓实际。在接下来的日子里，我会朝这个方向努力，在实验操作方面我会更加谨慎。
本次实习是我第一次亲身感受了所学知识与实际的应用，理论与实际的相结合，让我们大开 眼界，也算是对以前所学知识的一个初审吧!这次实习对于我们以后学习、找工作也真是受益匪浅。 我会把这此实习作为我人生的起点，在以后的工作学习中不断要求自己，完善自己，让自己做的更好。
⬮ 微生物检测的工作计划 ⬮
五彩火锅
美国黄石国家公园里的大棱镜温泉色彩斑斓，秘密就在于那里生活着多种喜欢高温的微生物。对于它们来说，泡个60℃～130℃的热水澡再舒服不过了。有些极耐热的微生物，一旦周围环境温度低于103℃，它们就会被“冻”死。
变色盐池
在美国旧金山海湾旁，有一片美丽缤纷的盐池。那里的“超级染匠”就是嗜盐微生物，它们的体内含有不同的类胡萝卜素，可以让盐池同时呈现红、橙、黄、绿等多种色块。
冰“血”瀑布
在南极冰川上的这些“血瀑布”里，生长着至少17种不同的嗜冷微生物。干燥寒冷的冻土和积雪就是它们的温馨家园，温度超过20℃，它们会“中暑”而亡。
硫酸天池
印度尼西亚的活火山克里木图有着丰富的硫酸矿，火山口形成的天池中含有多种嗜酸微生物。它们的生长为湖水带来了碧蓝、翠绿、棕红、乌黑等浓艳而“诡异”的色彩。
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微生物的呼吸类型
在微生物体中，能量的释放。ATP的生成都是通过呼吸作用实现的。
根据最终电子受体性质的不同，可将微生物的呼吸分为发酵、好氧呼吸和无氧呼吸3种类型。
1．发酵
发酵（fermentation）是指有机物氧化过程中脱下的质子和电子，经辅酶或辅基（主要有NAD，NADP，FAD）传递给另一有机物，最终产生一种还原性产物的生物学过程。
发酵的特点为：不需氧；有机物氧化不彻底；能量（有效电子）释放不完全。值得注意的是，由于发酵中作为电子和质子(转载于:ol的ATP、与葡萄糖完全一样，并没有得到任何削弱。如果就上述而论，那么发酵作为控制有机质污染的措施是毫无效果的。然而，好在某些发酵（如沼气发酵）的不稳定产物为气体（如CH。），它能从系统内逸出，不再对水体产生污染。
2．好氧呼吸
所谓好氧呼吸（resPiration），是指有机物在氧化过程中放出的电子，通过呼吸链传递最终交给氧的生物学过程。
好氧呼吸的特点是：以氧为最终电子受体；有机物被彻底氧化成CO2和H2O，并生成ATP。由于最终产物二氧化碳和水不再含能，也不再有释放电子的能力，因此它们不会耗氧，有机物的污染也由此消除。
3．无氧呼吸
无氧呼吸（anaerobicresPiration）是指有机物氧化过程中脱下的质子和电子，经一系列电子传递体最终交给无机氧化物的生物学过程。
无氧呼吸的特点是：没有分子氧参加反应，电子和质子的最终受体为无机氧化物（NO；有机物的'氧化彻底；但释放的能量低于好氧呼吸。无氧呼吸的电子和质子受体实际上分别由两种元素承担。无机氧化物中的氧充当了质子受体的角色，与之结合的其他元素则充当了电子受体的角色。由于后者的氧化能力弱于氧，因此以它作电子受体所释放的能量就相对较少，而且当无氧呼吸所形成的产物排人有氧环境时，存在着被氧重新氧化的可能，可见它们依然是潜在的污染物质。但这种污染物是否表现出污染，取决于充当电子受体角色的元素的易氧化程度。
［例2．24微生物呼吸作用的本质是什么？可把微生物的呼吸作用分为哪几种类型？各类型有什么特点？
答：微生物呼吸作用的本质是氧化与还原的统一过程，这过程中有能量的产生和能量的转移。微生物的呼吸类型有发酵／好氧呼吸和无氧呼吸。发酵的特点为不需氧；有机物氧化不彻底；能量（有效电子）释放不完全。好氧呼吸的特点是以氧为最终电子受体；有机物被彻底氧化成CO；有机物的氧化彻底，但释放的能量低于好氧呼吸。
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2020年11月18日-24日是“世界提高抗微生物药物认识周”，为提高中堂镇群众合理使用抗微生物药物的意识和水平，减少不必要的药物使用，营造全社会关心、支持和参与抗微生物药物合理使用的良好氛围，我局围绕“团结起来保护抗微生物药物”的活动主题开展宣传活动。现将活动情况总结如下：
一、加强组织领导
为确保“2020年提高抗微生物药物认识周”活动顺利进行，提高群众对个人卫生习惯的重视，我局紧紧围绕“团结起来保护抗微生物药物”的活动主题，结合工作实际，制定了活动宣传方案，明确职责分工，使本次活动得到有效宣传。
二、开展宣传活动
（一）现场义诊咨询活动。11月14日，我局联合镇社卫中心、中堂医院分别在镇中心广场开展义诊宣传活动，活动现场设置了义诊、健康咨询和有奖问答等摊位，免费为群众提供血压、血糖等检测服务，为群众讲解如何正确使用抗微生物药物，提高群众对抗微生物药物的认识。期间，向群众派发健康知识小册子，倡导群众将抗微生物药物知识带回家。活动共发放健康知识小册子500多份，受益人数达70多人。我局将于11月27日下午在中堂镇浅水湾项目部开展现场义诊咨询活动。
（二）开展行业学术活动。为提高合理使用抗微生物药物的意识和水平，11月18日，中堂医院开展了抗微生物药物临床合理使用专题讲座。讲座深入浅出地介绍了抗微生物药物的定义，如何正确使用，得到了医务人员的高度认可，提高了对抗微生物药物的认知水平。同时，编制了“正确认识抗菌药和消炎药”用药宣传资料，让群众认识到并非所有炎症都需要使用抗微生物药物。
（三）借助新媒体广泛宣传。各村（社区）积极在村微信群广泛转发抗微生物药物海报和《着眼未来 停止过度使用和误用抗菌药物宣传短视频（专业版）》视频。同时，利用水乡中堂、中心社区公众号发送抗微生物药物相关推文，推文标题为“提高抗微生物药物认识周开始啦！一起团结起来保护抗微生物药物！”。据统计，本次共发布抗微生物药物相关推文1篇，在38个村微信群转发抗微生物药物视频，阅览人数达1万多人次。
中堂镇卫生健康局
2020年11月26日
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作为一名微生物学的学生，我有幸能够在实习中深入了解这个领域的知识和技能，并且实践中得到了很好的培养。经过三个月的实习，我认为这是一次非常难得的经历，并且在未来的学习和职业生涯中都将为我提供帮助。在实习期间，我主要在微生物实验室工作，新奇而有趣的实验经历给我的视野带来了翻天覆地的变化。我学会了如何准备培养基和培养菌种，如何进行菌落计数及鉴定，并且了解了细菌和真菌的区别，以及其在环境和医学领域中的重要作用。
在实验室中，我收获了很多。最重要的是，我学会了如何遵守实验室安全规则和程序。同时，我也懂得了如何正确地处理实验室中的化学品和废物，以使实验室环境和员工受到最小影响。在实验室中，从培养基的制备到养殖过程的细心监控，每个细节都非常重要，任何疏忽都可能会导致实验失败。因此，我学会了控制时间，严格实施每一个步骤，以获得最佳的结果。
实习期间，我也学习了微生物工业生产方面的知识，如如何利用微生物发酵制备酸奶和肉类制品等。我还了解了微生物在生态学中的应用，如植物和动物肠道菌群的影响等。这些知识对我的专业课程和未来的职业生涯都将大有帮助。
在实习的过程中，我非常感慨我们小组里的紧密合作，我们互相帮助，鼓励，共同克服问题和完成实验。这种团队精神对于实验室的成功非常关键，同时也体现了人际关系的重要性。
总的来说，我在这个实习的过程中学到了很多，从基础的培养技能到研究微生物在工业和生态学中的应用，包括实验设计和数据分析。我学到了很多技术和科学 的内容，同时还了解了一些关键的实验室管理技巧和工作合作原则。这次实习对我专业和个人发展都具有深远的意义，使我更完整的掌握了我的专业知识，并且帮我更好地了解这个领域的工作方式和流程。我相信这种经验将给我的未来学习和职业发展打下坚实的基础。
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微生物重点总结
一．名词解释
（1）益生菌（probiotics）:某些细菌或真菌有利于宿主胃肠道微生物区系的平衡，能抑制对宿主有害的微生物的生长。
（2）无特定病原体动物（SPF）：是指不存在某些特定的具有病原性或潜在病原微生物的动物。
（3）灭菌（sterilization）:杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽孢、霉菌孢子在内的全部微生物和非病原微生物。
（4）消毒（disinfection）:杀灭病原微生物的方法，仅要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。
（5）消毒剂（disinfectant）:用于杀灭病原微生物的化学药品。（6）半数致死量（LD50）：是指能使接种的实验动物在感染后一定时限内死亡一半所需的微生物量或毒素量。
（7）半数感染量（ID50）：某些病原微生物只能感染实验动物、鸡胚或细胞，但不引致死亡，可用ID50来表示其毒力。
（8）毒力因子（virulence factor）:构成细菌毒力的物质称为毒力因子，主要有侵袭力和毒素。
（9）机会致病菌（oppotunistic pathogene）:是指某些细菌通常并不主动入侵宿主，但当宿主的免疫屏障被打开或免疫功能异常时，这类细菌就会进入机体的血液或组织，造成感染并治病。
（10）质粒（plasmid）:是细菌染色体外的遗传物质，多为环状双螺旋DNA分子。质粒可以自身复制，随宿主菌分裂传到子代菌体。（11）毒力岛（pathogenicity island）:PAI是指病原菌的某个或某些毒力基因群，分子结构和功能有别于细菌基因组，但位于细菌基因组之内，因此称之为“岛”。
（12）转化（transformation）:供体菌裂解游离的DNA片段被受体菌直接摄取，使受体菌获得新的遗传性状的过程称为转化。
（13）转导（transduction）:以温和噬菌体为媒介，把供体菌的DNA小片段携带到受体菌中，通过交换与整合，使受体菌获得供体菌的部分遗传性状称为转导。
（14）微生物：（micro live）：是一类肉眼看不见，有一定形态结构，能在适宜环境中生长繁殖的细小生物的总称。
（15）菌落（colony）：细菌在适合生长的固体培养基或内部生长，形成一个肉眼可见的，有一定形态的独立群体称为菌落。
（16）培养基（culture medium）：是人工配制的基质，含有细菌生长繁殖必须的营养物质。
（17）虑过除菌（sterilization by filtration）：是通过机械、物理组留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、支原体以及细菌L型等颗粒。
（18）感染（infection）：是指病原微生物在宿主内持续存在或增殖。（19）接合（conjugation）：是两个完整的细菌细胞通过性菌毛直接接触，由供体菌将质粒DNA转移给受体细菌的过程。
（20）侵袭力（invasiveness）:病原菌在机体内定殖，突破机体的防御屏障，内化作用，繁殖和扩散，这种能力称为侵袭力。二 填空题
（1）1683年荷兰人吕文虎克用自制的放大200倍的显微镜首次观察到微生物。
（2）八大类微生物：细菌 真菌 放线菌 支原体 螺旋体 立克次氏体 衣原体 病毒。
（3）巴斯德用曲颈瓶实验证明了自然发生论是谬论。
（4）细菌的大小以生长在适宜的温度和培养基的幼龄对数期培养物为标准。
（5）细菌的基本形态分为球状 杆状 螺旋状。（6）细菌的繁殖方式都是简单的裂殖。
（7）磷壁酸是革兰氏阳性菌特有的成分，肽聚糖是细胞壁所特有的物质。
（8）细菌的特殊结构有：荚膜 S层 鞭毛 菌毛 芽孢等
（9）细菌菌体的形成是一个复杂的过程，涉及物质摄取
生物合成 聚合作用
组装4个步骤。
（10）热力灭菌法分为干热灭菌法和湿热灭菌法两大类。
（11）在干热的情况下，由于热空气的穿透力低，需要160摄氏度维持2小时，才能达到杀死所有微生物及其芽孢 孢子的目的。（12）最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，于121·3摄氏度维持15-20分钟可杀死包括芽孢之内的所有微生物。
（13）遗传变异一般包括基因突变和基因转移两个方面，基因突变一般包括点突变和染色体畸变。染色体畸变是指染色体的一大段发生了变化，包括染色体结构上的缺失 重复 插入 易位和倒置。（14）2005我国曾有猪链球菌2型大范围感染人和猪的报到。（15）大肠杆菌抗原主要有O K H 三种。（16）粘附素包括菌毛 外模蛋白
紧密素等
（17）病毒的核酸分为两大类，DNA 和RNA,二者不同时出现，把MRNA的碱基序列作为标准，凡与此相同的核酸称为正链，与其互补的称为负链。
（18）真菌从形态上分为酵母菌 霉菌及担子菌三大类。
（19）支原体是一类无细胞壁的细菌，具多形性，可通过细菌滤器。（20）能形成芽孢的杆菌有：
三
简答题 革兰氏染色的步骤有哪些？
2细菌的生长曲线如何确定？有何意义？ 3大肠杆菌与沙门氏杆菌的生长特性有何区别？ 4细菌芽孢有何作用？
5确定某种细菌是否致病性的依据主要有哪些？
6近年来随着分子生物学的发展，基因水平的科赫法则取得了那几点共识？
7内毒素与外毒素的生长特性有哪些区别？ 8鸡霍乱与鸡新城疫的区别有哪些？ 9溶血分为哪几种？主要特点有哪些？ 10如何鉴别支原体菌落 细菌菌落及细菌L型菌落？ 11抗原性漂移与抗原性转移有何显著特点？ 12病毒的一般特征？
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关于微生物需要的条件
1.充足的营养：必须有充足的营养物质才能为细菌的新陈代谢及生长繁殖提供必需的原料和足够的能量。
；嗜温菌，20℃～40℃；，在高至56℃～60℃生长最好。病原菌均为嗜温菌，最适温度为人体的体温，即37℃，故实验室一般采用37℃培养细菌
有些嗜温菌低温下也可生长繁殖，如5℃冰箱内，金黄色葡萄球菌缓慢生长释放毒素，故食用过夜冰箱冷存食物，可致食物中毒。
。人类血液、组织液PH为、乳本乡
杆菌（pH。细菌代谢过程中分解糖产酸，PH下降，影响细菌生长，所以培养基中应加入缓冲剂，保持PH稳定。
否则生长很差甚至不能生长。
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微生物：一类分布广泛、体积微小、结构简单、肉眼直接看不到，微小生物的总称。
细菌L型：细菌细胞壁的肽聚糖结构受理化或生物因素直接破坏或合成被抑制，这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活，称细菌细胞壁缺陷型或L型。
质粒：是染色体外的遗传物质，控制某些特定的生物学性状，不是细菌生长所必需。
荚膜：是细菌合成分泌的包绕于细胞壁外的一层粘液性物质。界限清晰性质稳定结合牢固。培养基：由人工方法经灭菌后制成，专供微生物生长使用的混合营养制品。一般pH为7.2-7.6。
兼性厌氧菌：兼有需氧呼吸和无氧发酵两种功能，无论在有氧或无氧环境中都能生长，但以有氧时生长较好，大多数病原菌属于此。菌落：在固体培养基中，经过十八到24小时培养后，单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细红细胞吸附：流感病毒等感染细胞后，由于细胞膜上出现了血凝素（HA），具有吸附脊椎动物红细胞的能力，这一现象称为红细胞吸附。抗毒素：通常是用细菌类毒素给马多次注射后，取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素：微生物来源的抗菌药物，以及人工化学修饰或半合成的衍生物
无菌：就是指没有活菌的意思。
1：细胞壁结构、化学组成及功能？答：化学组成：G+①肽聚糖：聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥②磷壁酸：粘附功能，与致病性有关；抗原性很强③其他成分：如A群链球菌的M蛋白G-①肽聚糖：聚糖骨架；四肽侧链②外膜：脂蛋白；脂质双层；脂多糖：脂类A（毒性成分，无种属特异性）；核心多糖；特异多糖。功能：①维持细菌固有形态②保护细菌抵抗低渗环境③物质交换④决定菌体的抗原性。2：G-菌与G+菌细胞壁的异同点及其意义？答：兼性厌氧菌、专性厌氧菌。
11：与医学有关的合成代谢产物？答：① 毒素与侵袭性酶：外毒素和内毒素②热原质：G-菌细胞壁的脂多糖，耐高温，250℃干烤破坏。③抗生素：某些微生物代谢中产生的一类能抑制或杀死其他微生物或肿瘤细胞的物质。④维生素：如VitK、B族维生素。⑤色素：脂溶性和水溶性色素。⑥细菌素：无治疗应用价值。13：病毒的形态、结构与化学组成。答：多数病毒呈球形或近似球形，少数呈杆状（植物病毒）、丝状（初分离的流感病毒）、弹状（狂犬病毒）、砖块状（如痘类病毒）和蝌蚪状（噬菌体）。病毒的核心和衣壳，二者构成核衣壳，病毒包膜和其他辅助结构。化学组成：核心：主要为核酸，化学组成为DNA或RNA。衣壳：包绕在核心外面的一层蛋白质，由许多蛋白质亚单位（壳粒）组成。包膜：化学组成： 脂质蛋白质糖类。
答：单细胞真菌呈圆形或卵圆形。多细胞真菌
结构：菌丝和孢子，菌丝：分为营养菌丝、气中菌丝、生殖菌丝；孢子：是真菌的繁殖体。结构：细胞壁外成分；细胞壁；隔膜；其他结构。
25：真菌培养特性。答：最常用的培养:沙保弱培养基。温度:多数都在22 ~ 28oC，但深部感染真菌最适温度为37oC，pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生长缓慢，1~4周。
26：真菌繁殖方式。答：①无性生殖：①由菌丝断裂形成新个体②细胞直接分裂产生子细胞③产生芽生孢子④产生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖：指经过两性细胞配合产生新个体的繁殖方式。
27：真菌抵抗力答：①对干燥、阳光、紫外线及常用消毒剂有强抵抗力②不耐热，菌丝与孢子60℃ 1小时均可杀死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌药物：菌集团。
纯培养基：挑取一个菌落，移种到另一培养基中，生长出来的细菌均为纯种。
毒性噬菌体：在宿主菌细胞内噬菌体增殖产生子代噬菌体，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。温和噬菌体：噬菌体基因与宿主菌染色体整合，成为前噬菌体，噬菌体DNA能随细菌DNA复制而复制，并随细菌的分裂而传到子代细菌的基因组中，变成溶原性细菌，形成溶原性周期。前噬菌体：整合在细菌染色体上的噬菌体基因。转座子：细菌基因组中的一段DNA序列，可以在染色体、质粒或噬菌体之间自行移动的遗传成分，伴随转座子的移动，会出现插入突变。基因转移：遗传物质由供体菌转入受体菌的过程为基因转移。
重组：转移的基因与受体菌DNA整合在一起称为重组，重组使受体菌获得供体菌的某些性状。转化：细菌通过性菌毛相互连接沟通，将质粒或染色体等遗传物质从供体菌转移给受体菌的过程。
接合：是受体菌直接摄取供体菌DNA片段，从而获得新的遗传性状的过程。
转导：以噬菌体为载体将供菌的DNA片段转移到受菌体内使受菌获得供菌的部分遗传性状。溶原性转换：某些前噬菌体可导致细菌基因型和性状发生改变，例如白喉棒状杆菌产生白喉毒素的机理，温和噬菌体感染细菌时，其基因可整合于宿主菌染色体中，使宿主菌获得噬菌体基因赋予的新的性状，称溶原性转换。原生质体融合：将两种不同的细菌经溶菌酶或青霉素等处理，失去细胞壁成为原生质体后进行融合的过程。融合后的染色体之间发生重组。病毒的自我复制：以病毒核酸为模板，经过复杂的生化过程，复制子代病毒的核酸并通过转录翻译产生病毒蛋白质，装配成熟后释放到细胞外，这种增殖方式称为病毒的自我复制。顿挫感染：被病毒侵入的细胞如不能为病毒增殖提供必需成分，则病毒不能合成本身成分，或能合成但不能组装和释出有感染性的病毒颗粒。非容纳细胞与容纳细胞
缺陷病毒：病毒基因组不完整或某一基因位点改变，不能正常增殖，不能复制出完整有感染性的病毒颗粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+辅助病毒完成复制
干扰现象：当两种病毒感染同一宿主细胞时，发生一种病毒的增殖抑制另一种病毒增殖的现象。某些病毒感染细胞时不出现CPE或其他易于测出的变化（如HAd），但能干扰其后感染的另一病毒的增殖，从而阻抑后者所特有的CPE 芽孢：某些细菌在一定环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内部形成的一个圆形或卵圆形小体。
正常菌群：正常人的体表和与外界相通的眼结膜，口腔、鼻腔、肠道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同种类和数量及对人体无害而有益的微生物。正常微生物群通称为正常菌群
细菌群体：细菌附着在有生命或无生命的材料表面后，由细菌及其所分泌的胞外多聚物共同组成的呈膜状的细菌群体。机会性感染：由正常菌群在机体免疫功能低下、寄居部位改变、菌群失调等特定条件下引起的感染。
毒力：致病性的强弱程度。
侵袭素：某些细菌的基因编码一些具有侵袭功能的蛋白多肽，促进该病原菌向邻近组织扩散甚至介导进入邻近黏膜上皮细胞内。
包涵体：细胞浆或细胞核内出现光镜下可见的斑块状结构
G+ 菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽侧链,五肽交联桥,三维立体②磷壁酸:重要表面抗原，与粘附致病有关，加强稳定细胞壁G－菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽侧链组成二维结构, ②外膜（脂蛋白、脂质双层、脂多糖组成）功能:屏障结构LPS是G－菌的内毒素。细胞壁结构异同:G+菌/G－菌--强度:较坚韧/较疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖层数:多可达50层/少，1-2层--肽聚糖结构:聚糖骨架,四肽侧链,五肽交联桥,三维立体/聚糖骨架,四肽侧链,二维平面--脂类含量/少/多--磷壁酸:有/无--外膜:无/有,由脂蛋白、脂质双层、脂多糖组成3：细菌L型，特殊结构种类、化学组成、抗原性及意义？答：定义：细菌细胞壁的肽聚糖结构受理化或生物因素直接破坏或合成被抑制，这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活，称细菌细胞壁缺陷型或L型。种类：G+菌细胞壁缺失后，仅有胞膜，称原生质体，G--菌肽聚糖层受损，尚有外膜，称原生质球。抗原性及意义：高度多形性，大小不一；大多染成G－；高渗低琼脂含血清培养基—油煎蛋样菌落；去除诱因后，有些可回复为原菌；某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性药对L型感染治疗无效
4：细菌的特殊结构？答：①荚膜：多糖或多肽的多聚体。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物质的损伤d有抗原性，用于细菌的鉴定和分型②鞭毛：蛋白质，由基础小体丝状体钩状体组成，高度抗原性。功能a是细菌的运动器官b某些细菌的鞭毛与致病性有关c根据鞭毛的动力和鞭毛的抗原性可用以细菌的鉴别和分类③菌毛：由亚单位菌毛蛋白构成。功能a黏附作用b传递遗传物质④芽孢：生产芽孢的细菌都是革阳菌。功能：a增强抵抗力b不直接致病c鉴定。
5：细菌的遗传物质？答：细菌染色体，质粒，噬菌体：
6：基因转移与重组方式的种类及定义？答：定义：基因转移：遗传物质由供体菌转入受体菌的过程为基因转移。重组：转移的基因与受体菌DNA整合在一起称为重组，重组使受体菌获得供体菌的某些性状。分类：转化,接合,转导,融合,转换.【表格】类型：基因来源/转移方式--转化：供菌游离的DNA片段/直接摄入--接合：供菌质粒DNA/ 性菌毛--转导：供菌任意DNA或噬菌体与供菌特定DNA/噬菌体--融合：两菌原生质体的DNA/融合--转换：温和噬菌体/吸附穿入
7：噬菌体及其相关概念。答：1）毒性噬菌体：在宿主菌细胞内噬菌体增殖产生子代噬菌体，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。2）温和噬菌体：噬菌体基因与宿主菌染色体整合，成为前噬菌体，噬菌体DNA能随细菌DNA复制而复制，并随细菌的分裂而传到子代细菌的基因组中，变成溶原性细菌，形成溶原性周期。
8：细菌生长繁殖的条件？答:营养物质/酸碱度 多数病原菌最适pH为7.2~7.6/温度 多数病原菌生长最适温度为37℃/气体 据代谢时对分子氧的需要与否，专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌/渗透压。
9：细菌群体的生长繁殖？答：生长曲线：一定数量的细菌接种到定量的液体培养基中，连续定时取样测定活菌数量，以培养时间为横坐标，以活菌数的对数为纵坐标作图，得到的一条曲线。迟缓期：适应阶段。对数期：对抗生素敏感，细菌鉴定选此期。稳定期：代谢产物形成（如外毒素、抗生素、芽胞等）。衰亡期：菌体细胞呈现多种形态。
10：按细菌对氧需要的分类？答：据代谢时对分子氧的需要与否，专性需氧菌、微需氧菌、14：双链DNA病毒的复制周期？答：vDNA（RNA聚合酶）→早期mRNA（翻译）→早期蛋白（酶）→ vDNA（酶）子代DNA → mRNA→结构蛋白.→子代DNA+结构蛋白→子代病毒。简要过程：吸附，穿入，脱壳，生物合成，组装、成熟与释放。
15：顿挫病毒，缺陷病毒的概念？答：顿挫病毒：被病毒侵入的细胞如不能为病毒增殖提供必需成分，则病毒不能合成本身成分，或能合成但不能组装和释出有感染性的病毒颗粒。非容纳细胞与容纳细胞。缺陷病毒：病毒基因组不完整或某一基因位点改变，不能正常增殖，不能复制出完整有感染性的病毒颗粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+辅助病毒=完成复制 16：细菌的感染与致病。答：感染：在一定条件下，微生物与机体相互作用并导致机体产生不同程度的病理过程。★
17：细菌的毒力比较，外毒素与内毒素生物学特性。答：【表格】种类：内毒素★外毒素。来源：G-菌★G+菌部分G-菌。编码基因：染色体基因★质粒或前噬菌体或染色体基因。存在部位：细胞壁成分、细菌裂解后释出★活菌分泌或细菌溶解后散出。化学成分：脂多糖★蛋白质。稳定性：好(160℃2~4h才破坏）★差（60~80 ℃30m可破坏）。毒性作用：弱、各种内毒素作用大致相同★强、对机体组织器官有选择性。抗原性：弱，甲醛处理后不能形成类毒素★强，能刺激机体形成抗毒素，经甲醛脱毒后能形成类毒素。
18：细菌感染的类型答：①不感染②隐性感染③潜伏感染④显性感染：急慢性感染；局部、全身感染⑤带菌状态。
19：病毒感染类型。答：①隐性感染②显性感染：急性病毒感染：潜伏期短，发病急，数日或数周回复，病原消灭型感染。持续性病毒感染：慢性病毒感染；潜伏性病毒感染；慢发病毒感染。
20：细菌的致病机制。答：细菌的致病性强弱取决于毒力，细菌的毒力因子：①侵袭力：致病菌突破宿主生理屏障，进入机体并在体内定植、繁殖和扩散的能力包括黏附素、荚膜和微荚膜、侵袭性物质②毒素：细菌产生的损伤宿主引起生理功能紊乱的毒性物质，包括内毒素和外毒素。
21：正常菌群的生理作用。答：①生物拮抗：竞争粘附（占位性保护）作用；产生有害代谢物质；营养竞争②营养作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。
22：病毒分离鉴定方法及病毒在培养细胞中的增殖的指标。答：病毒的分离：①动物接种②鸡胚培养；流感病毒初次分离接种于羊膜腔；流感病毒的再培养接种于尿囊腔③组织培养④细胞培养 — 病毒分离鉴定中最常用的方法单层细胞培养；原代细胞培养；二倍体细胞培养；传代细胞培养。指标：1）细胞的变化①细胞病变效应：有些病毒在细胞内增殖时引起的特有的细胞病变，如细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落②多核巨细胞形成：有些病毒如麻疹病毒、巨细胞病毒等作用于细胞膜，使邻近的细胞融合，形成多核巨细胞③胞质或核内包涵体的形成狂犬病病毒、巨细胞病毒。2）红细胞吸附流感病毒等感染细胞后，由于细胞膜上出现了血凝素，具有吸附脊椎动物红细胞的能力，这一现象称为红细胞吸附。常用来鉴定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3）.红细胞凝集检测含血凝素病毒的方法4）干扰现象5）空斑形成试验。
23：病毒成份的检测（抗原、核酸检测）答：1.病毒抗原的检测2.病毒核酸的检测
24：真菌的形态结构（单细胞和多细胞真菌）。
灰黄霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑；对抗生素不敏感。
28：抗菌药物的种类与作用机制。答：杀菌药和抑菌药。机制：①抑制细菌细胞壁的合成②抑制细菌
细胞膜功③抑制细菌蛋白质合成④抑制细菌核酸合成。29：细菌耐药的机制。答：产生钝化酶；细胞通透性的改变；靶位结构的改变；建立代谢旁路；代谢酶分子的改变
30：医院感染的定义。答：由医院的病原生物或其毒素导致的局部或全身感染性疾病。
31：细菌分离培养和鉴定、生化试验、血清学试验？答：细菌分离培养和鉴定：原则上应对所有送检标本做分离培养，以便获得单个菌落后进行纯培养，从而对细菌做进一步的生物学、免疫学、致病性或细菌的药物敏感性等方面的检查，最终获得确切的报告。生化试验：得到细菌的纯培养物后，用糖发酵试验，吲哚试验，硝酸盐还原实验等对细菌的酶系统和其代谢产物的检查，是鉴别细菌的重要方法之一。血清学实验：利用含已知的特异性抗体的免疫血清，对细菌进行群和型的鉴别。
微生物种类名称★生物学性状★致病物质、致病机理及所致疾病
破伤风梭菌：菌体细长，芽胞正圆比菌体粗，位于菌体顶端菌体鼓槌状★不发酵糖类，不分解蛋白质。条件：局部伤口需形成厌氧微环境，伤口窄而深，有泥土或异物污染，大面积创伤，坏死组织多，局部组织缺血，同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口。防治原则：特异性预防：注射破伤风类毒素主动免疫；迅速对伤口清创扩创，防止形成厌氧微环境；紧急预防：TAT（精制破伤风抗毒素）；治疗： 早期足量使用TAT，抗生素。产气荚膜梭菌：G+粗大杆菌，芽胞位于次极端，椭圆形，直径小于菌体形成明显荚膜★血平板：双层溶血环，代谢十分活跃，牛奶培养基：“汹涌发酵”现象。增加血管通透性，组织坏死，气性坏疽，食物中毒，坏死性肠炎。
肉毒梭菌：G+粗短杆菌，芽胞位于次极端，椭圆形，菌体呈网球拍状，严格厌氧，分型多，生化反应复杂★肉毒毒素，抑制乙酰胆碱释放，引起运动神经末梢失调→肌肉麻痹；食物中毒，婴儿肉毒中毒。
支原体：菌落油煎蛋型，高度多形态型，细胞膜含高度固醇，无细胞壁，对青霉素有抵抗作用★支原体肺炎，病变为间质性肺炎，可合并支气管肺炎。称为原发性非典型性肺炎。不规则发热，刺激性咳嗽，头痛。婴幼儿病情严重，发病急，病程长，以呼吸困难为主。有些合并其他系统病变，如循环系统等。飞沫传播。立克次体：是一类体积微小，绝大多数为自身代谢不完善，严格细胞内寄生的原核细胞型微生物★流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫病、Q热
衣原体：严格细胞内寄生，有独特发育周期，能通过细菌滤器，原核细胞型微生物★ 沙眼:感染眼结膜上皮细胞→增殖，包涵体→局部炎症→早期流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生→后期结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜损害→影响视力或致盲包涵体结膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原体肺炎、性病淋巴肉芽肿
螺旋体：是一类细长、柔软、弯曲、运动活泼的原核细胞型微生物基本结构及生物学形状与细菌相似★梅毒，人是唯一传染源，致病物质为荚膜样物质，透明质酸酶；后天通过性接触传播或者先天经过母体传播。
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关于实验微生物接种技术
一、目的：
学习微生物工作的基本接种方法，建立纯培养技术中的“无菌”概念，掌握无菌操作技术。
二、原理：
所谓接种就是将一定量的纯种微生物在无菌操作条件下转移到另一已灭菌，并适宜于该菌生长繁殖所需的培养基上的过程。本实验要求严格进行无菌操作，一般是在无菌操作台或在实验室内火焰旁进行。根据不同的实验目的和培养方式，可以采用不同的接种工具和接种方法。
三、实验材料：
斜面培养基、液体培养基、平板培养基、记号笔、酒精灯、接种针、消毒酒精、涂布棒等。
四、操作步骤
（一）无菌操作
菌种分离或移接工作应在无菌环境中进行，接种室、接种箱或超净工作台是常用的接种环境。用前先清洁好卫生，再进行消毒处理。可用紫外线灯和甲醛熏蒸的双重作用，或用3%来苏尔及其他表面消毒进行喷雾。
操作者的手应先用肥皂洗净，再用酒精棉球消毒；整个操作过程都要靠近酒精灯火焰；接种工具在用前和用后必须在灯焰上灭菌；棉塞不得乱放，操作中只能夹在手上；不能有跑、跳等力度大的'动作，以免引起空气大振动而增加染菌机会。
（二）接种方法
（1）斜面接种：
从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。此法用于好气性微生物的接种。
左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。用右手先将棉塞拧转松动，再拿接种环，用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧，同时将管口在火焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划曲线或直线。
（2）液体接种：
由斜面菌接种到液体培养基（如试管或三角瓶等）中的方法。
操作与上法基本一致，只是在将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。如果菌种是培养在液体培养基中时，一般用移液管或滴管接种。
（3）穿刺接种：
用接种针挑取菌种后，插入深层固体培养基内，（不要刺到底部），再沿原路拔出，此法用于厌气性细菌接种、检查细菌的运动能力。
（4）平板接种：
将菌种接至培养皿的方法，平板接种的目的是观察菌落形态、分离纯化菌种，活菌计数以及在平板上进行各种试验时采用的一种接种方法，可分为下面几种：
1)斜面接平板
a.划线法：见平板划线分离法。
b.点种法：一般用于观察霉菌和酵母细胞，轻轻点在平板的表面（根霉点一点，曲霉、酵母可点即可。
保存之用。
五、思考题
1．何谓无菌操作？接种前应作哪些准备工作？
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对水费争议的认识
在物业水费争议中，很常见的是小区内异常管漏所增加的水费由谁承担问题。法律审判实践中已有明确结论即：业主的房屋尚在合同约定保质期内或者水管的合理使用期限内，水管质量和安装质量由房屋的建设开发商承担；如果管漏、管裂是由于重型汽车碾压等外力原因造成的，则由致害者承担责任；如果物业管理公司未定期检查和发现管漏、管裂原因并及时抢修，其扩大的水费损失应由物业管理公司承担；如果异常的管漏、管裂损失是在物业管理公司尽到管理职责后仍不可避免而产生的损失，则由小区业主承担。物业管理公司对小区供水设施和状况存在“经常检查”、及时发现管裂、总表异常情况的义务，对异常管漏所增加的水费也有由小区业主和物业管理公司分担解决。
综上所述，我部门认为虽然公司与物业公司正式签订了供用水合同，但物业公司作为合同权利义务的法律主体是存在明显争议的，如果其拒绝签订供用水合同也是有法律依据和相关判例支持的。即便如此，在目前情况下我公司对外仍应以物业公司作为最终用户，及时签署用水协议依法维护公司的合法权益，在发生纠纷时根据不同情况，适度采取有效措施，合理予以解决。
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